ISOLATION OF CAMPYLOBACTER FETUS INFECTION IN SHEEP IN NORTH AREA OF SYRIA

Document Type : Research article

Authors

1 Department of Animal Diseases, Veterinary College, AL-Baath University, Syria.

2 Dept. of Infectious Diseases, Fac. Vet. Med. AL-Baath University

3 Dept. of Meat Hygiene, Fac. Vet. Med. AL-Baath University.

Abstract

This study has been carried out on 171  aborted ewes in 13 sheep folds in 3 Syrian provinces (Aleppo-Alraqa -Der alzor). The culture of these samples has been done, then the biochemical tests have been carried out on the positive samples to distinguish Campylobacter fetus. It has been proved that 15 samples have shown positive results for Campylobacter fetus which equals 8.77%. The highest percentage of abortions caused by Campylobacter in Aleppo was 10.5%, whereas it was 6.9% in Alraqa, the percentage was 5.4% in Der alzor. The research included the scientific discussion of this result, and the conclusions.

Keywords


Department of Animal Diseases,

Veterinary College, AL-Baath University, Syria.

 

Isolation of Campylobacter fetus infection in sheep in north area of Syria

(With One Table)

 

By

M. elewe ; Y. Al-yaseno* and A. Arwana**

* Dept. of Infectious Diseases, Fac. Vet. Med.AL-BaathUniversity.

** Dept. of Meat Hygiene, Fac. Vet. Med.AL-BaathUniversity.

(Received at 20/11/2010)

 

عزل المقوسة الجنينية عند الأغنام في المنطقة الشمالية من سورية

 

محمد العليوي ، ياسين الياسينو ، عبد العزيز عروانة

 

أجريت الدراسة على 171 نعجة مجهضة من 13 قطيع أغنام في ثلاث محافظات من سورية (حلب – الرقة – دير الزور). وقد تم إجراء الزرع الجرثومي لهذه العينات ، ومن ثم إجراء الاختبارات البيوکيميائية على العينات الايجابية المشتبهة لتمييز الکامبيلوباکتر الجنينية. وقد تبين أن 15 عينة من العينات المفحوصة أبدت نتائج ايجابية للکامبيلوباکتر الجنينية أي بنسبة 8.77%. حيث سجلت أعلى نسبة للإجهاض بالکامبيلوباکتر الجنينية في محافظة حلب 10.5% ، بينما بلغت في محافظة الرقة نسبة الإجهاض بالکامبيلوباکتر الجنينية 6.9%، أما في محافظة دير الزور فقد کانت النسبة 5.4%. کما تضمن البحث المناقشة العلمية لهذه النتائج ، وأهم الاستنتاجات.

 

SUMMARY

 

This study has been carried out on 171  aborted ewes in 13 sheep folds in 3 Syrian provinces (Aleppo-Alraqa -Der alzor). The culture of these samples has been done, then the biochemical tests have been carried out on the positive samples to distinguish Campylobacter fetus. It has been proved that 15 samples have shown positive results for Campylobacter fetus which equals 8.77%. The highest percentage of abortions caused by Campylobacter in Aleppo was 10.5%, whereas it was 6.9% in Alraqa, the percentage was 5.4% in Der alzor. The research included the scientific discussion of this result, and the conclusions.

 

Key words: Campylobacter, sheep, abortion, fetus.

 

Introduction

مقدمــة

 

في عام 1886 نشر الباحث (Escherich) مقالة علمية تضمنت وصف لجراثيم لولبية من مستعمرات أخذت من الأطفال الذين ماتوا بما يسمى کوليرا الأطفال (Dasti, 2007) ، وفي عام 1906 کتب العالمان (Mc fadyean and Stockman) عــن کيفيــة العـزل الأول لمـا يسمـى حاليـاً (الکامبيلـوباکتـر) (Mcfadyean and Stockman, 1913)

إن الجراثيم المعروفة الآن بالکامبيلوباکتر عزلت بنجاح في بداية هذا القرن عام 1913 حيث عزل (Mc fadyean and Stockman) البکتريا الشبيهة بالضمات  related Vibrio من الأغنام (Dasti, 2007; Senok and Boota, 2009)، وبعد 5 سنوات اکتشف (Smith) في عام 1918 بکتريـا لولبية في أجنة الأبقار المجهضة واستنتج أن هذه العترات وضمات Mc fadyean and Stockman)) تنتمي إلى نفس النوع (Smith, 1918)، وبسبب شکلها الذي يشبه الضمة اقترحSmith and Taylor)) في عام 1919 اسم الضمات الجنينية لهذه الجراثيم وسميا المرض الإجهاض الضمي "vibrionic abortion"(Skirrow, 1977; Fox, 1982; Butzler,1984; Franco,1988)  وفي وقت لاحق من عام 1959 أظهر ((Florent نوعين من الضمات المتشابهة تسبب مشاکل في الخصوبة عند الأبقار والأغنام ، أحد هذه الأنواع يسبب العدوى في الأبقار فقط وينتشر بواسطة الثيران أثناء الاتصال الجنسي، أما الأبقار التي خمجت فلم يحدث عندها أي شکل من أشکال الحمل وسمي المرض العقم المعدي infectious، أما النمـط الثاني فقد سبب الإجهاض المتقطع ولم يسبب العقم عند الأبقار والأغنام (Florent, 1959). واقترح Veron and chatelaine)) في عام 1973 م اسم الکامبيلوباکتر الجنينية تحت نوع الجنينيةCampylobacter fetus ssp fetus  للجراثيـم التـي تسبب الإجهاضات المتقطعـة في الأبقـار والأغنـام والکامبيلوباکتر الجنينيـة تحت نـوع التناسليـةC. fetus ssp venerealis  للجراثيم التي تسبب العقم المعدي (Prévot, 1940). شکّل جنس Spirillum وجنس Campylobacter عائلة Spirillaceae وهذا التجمع للأنواع المختلفة في عائلة واحدة مبني على أساس عدد من الصفات الشکلية (Buchanan and Gibbons, 1974)، وفي عام 1989م ألغي استعمال اسم العائلة Spirillaceae واعتبر جنس الکامبيلوباکتر ينتمي إلى صنفProteobacteria  (Vandamme et al., 1991). وإن اسم الکامبيلوباکتر لهذه الجراثيم مشتق من الکلمة اليونانية " " Kampylos التي تعني المنحني (Moran and Upton, 1987). يملک الکامبيلوباکتر سوط قطبي غير مغمد مفرد (وحيد السوط) أو سوط في کل نهاية (سوطين متقابلين) (Goodwin,1985 and Jones et al., 1985). وتکون حرکة الکامبيلوباکتر بواسطـة السـوط المفـرد أو المتعدد في أحدى أو کلتا النهايتين (Ursiing et al., 1984)، وعدد السياط ليس له أهمية في تصنيف الکامبيلوباکتر بسبب الاختلاف الکبير في ترتيب السياط في الأنواع والعترات المختلفة (On et al., 1995) ، أما الحـرکـة فتکون سـريعـة اندفاعية على هيئة اللولب (Karmali and Fleming, 1979). الکامبيلوباکتر الذي له شکل الفاصلة له سوط قطبي واحد ، بينما الکامبيلوباکتر الذي له شکل حرف S له سوط في کلا القطبين ، أمـا اللولب فهـو ناشئ عـن اتحـاد أعـداد مـن الکامبيلوباکتـر التي لهـا شکـل S (McCoy et al., 1975). يکون النمو في ظروف لاهوائية أو قليلة الهواء وتتطلب هذه الجراثيم10) Co2  - 20 %( وأوکسجين  5)% أو أقل)، ويکون النمو على آغار دموي أوثيول آغار أو آغار القلب والدماغ، وتضاف المضادات الحيوية مثل النوفوبيوسينNovobiocin  والباستراسين Bacitracin لتثبيط نمو الجراثيم الأخرى (Plastridge et al., 1964). تظهر المستعمرات عادة بعد يومين من الزرع ، وهي دائرية مرتفعة وشکلها نظامي ولها لزوجة الزبدة وهي نصف شفافة في البداية ثم تصبح معتمة (Timoney et al., 1988). وتنموC.fetus subsp fetus  على درجة 25م ويمکن أن تزرع على  37م (Smibert and Von Graevenenitz, 1980). ويکون طول هذه الجراثيم  0.5- 5مم وعرضها 0.2 - 0.8 مم (Hazeleger et al., 1994) وتحصل العدوى عن طريق ابتلاع الأغنام للعلف والماء الملوثين بالعامل المسبب (Dyre, 2008).

ومن الممکن أن يکون طائـر العقعـق والغربان لهما دور في نقل العدوى وأيضاً تلعب بعض الأغنام التي لا تظهر عليها الأعراض دوراً في نقل العدوى (Meinershagen et al., 1965; Smibert, 1965; Dennis, 1967). وقت العدوى له أهمية في تحديد مدى الإجهاض حيث أنه في العدوى التجريبية عند 105 يوم من الحمل أجهض 100 % من الإناث الحوامل ، وإذا حدثت العدوى بعد 3 أسابيع من ذلک تنخفض نسبة الإجهاض إلى 20 % وهذا ربما يعکس زيادة المناعة عند الجنين (Grogono-Thomas et al., 2000). وتعتبر القناة التناسلية للأغنام والأبقار والمشائم ومحتويات معدة الجنين المجهض من مصادر العدوى (Smibert, 1984)، أما المخازن الثانوية فهي الطيور وحيوانات أخرى (Garcia et al., 1983). يحدث الإجهاض بعد العدوى ب 7 -25 يوم وينتشر بشکل سريع بسبب الأعداد الکبيرة للجراثيم في مواد الإجهاض ، وفي العدوى التجريبية تطرح الأغنام العامل المسبب بشکل متقطع مع البراز حتى 42 يوم. ويميل المرض لأن يکون متقطعاً في بريطانيا على الرغم من أن بعض القطعان يکون إجهاضها بشکل جائحات کل4 -5 سنوات وربما يکون هذا عائداً إلى تضاؤل المناعة عند الأغنام أو أنه تم إدخال أغنام حاملة للمرض (Mearns, 2007). تسبب الکامبيلوباکتر الجنينية إجهاض متقطع في الأغنام والأبقار ويمکن أن تنشأ العدوى في الأمعاء من خلال ابتلاع الماء والطعام الملوثين بالعامل المسبب (Cottral, 1978). العرض الأساسي لهذا المرض هو الإجهاض في الأسابيع الست الأخيرة من الحمل وولادة حملان ضعيفة (Mearns, 2007). إذا حدثت العدوى أثناء الحمل المبکر ستمتص الأغنام الجنين ، وإذا حدثت العدوى في منتصف الحمل سيحدث الإجهاض بعد 10 -  20 يوم أما إذا حدثت العدوى في آخر الحمل سينتج ولادة حملان ضعيفة أو ميتة (Justin and Luther, 2006). تترکز التغيرات المرضية الملاحظة في الأغنام المخموجة بشکل رئيسي في الرحم والمشيمة والجنين ، ويلاحظ بقع تنکرزية في الکبد ويوجد بؤر من خلايا وحيدة النواة أو فرط تنسج شبکي بطاني في العديد من النسج (Smibert, 1965) . تظهر على الکبد بؤر تنکرزية صفراء قطرها 2- 3سم مع حواف غير منتظمة ويکون الکبد متضخم وهش وعليه بقع تنکرزية (Hum et al., 2009). تؤخذ العينات من المشيمة ومحتويات معدة الجنين من الأغنام المجهضة ومن الدم ومحتويات الأمعاء والمرارة للأغنام المخموجة (Bryner et al., 1964). إذا احتوى المنبت على  cephalothinفإننا لن نستطيع عزل الکامبيلوباکتر الجنيني تحت نوع الجنيني لان هذه الجراثيم حساسة لل cephalothin علاوة على ذلک فان درجة حرارة التحضين 42م سوف تمنع نمو هذا التحت نوع (Harvey and Greenwood, 1983) وتظهر أنماط متعددة من المزارع عند الزراعة الأولية فهناک مستعمرات ناعمة وهناک مستعمرات خشنة، قطر المستعمرات الناعمة 1ملم وهي إما ليس لها لون أو لها لون کريمي خفيف وعندما تحضن إلى 6-8 أيـام تصبح مخاطية والمستعمرات الخشنة مـدورة ومحببـة ولونهـا ابيض عاتـم أو کريمي أو مسمر وقطرها  2 -1ملم (Bryner et al., 1962; Bryner et al., 1964). يمکن للکامبيلوباکتر الجنينية تحت نوع الجنينية أن تشاهد بسهولة في المحسات من الفلقات الطازجة ومحتويات معدة الجنين والرئة بالزراعة على آغار دم الأغنام مع أو بدون إضافة الصادات الحيوية النوعية في جو 10% منCo2  (Plastridge et al., 1961). يمکن أن نستخدم تقنية الأجسام المضادة المشعة في التشخيص لکن ذلک يکون مستحيلاً عندما تکون العينة ملوثة بالبراز (Andrew and Frank, 1974). ويعتمد التشخيص على العدد الکبير من الجراثيم المنحنية السلبية الغرام العصوية في مسحات المشيمة والفلقات ومحتويات معدة الجنين وتحديد الأنواع يعتمد على الزرع على المنابت التمييزية تحت الظروف اللاهوائية(Mearns, 2007) . للأغنام مناعة طويلة الأمد بعد العدوى فيما لو أجهضت، وهذا يستخدم کطريقة لقاح طبيعية عن طريق خلط الأغنام المجهضة مع الأغنام الغير حوامل (Mearns, 2007). ويعطى لقاح الکامبيلوباکتر الجنيني قبل الولادة ب 30يوم ويعاد بعد 60-90يوم ، ومن أساليب الوقاية إعطاء الغذاء والماء النظيفين ووضع الأغنام التي ولدت في مکان خاص (Justin and Luther, 2006).

ويهدف البحث إلى عزل الکامبيلوباکتر الجنينية عند الأغنام في محافظات المنطقة الشمالية من سورية.

 

Materials and Methods

مواد وطرائق البحث

 

أولاً :جمع العينات : Samples collection

تم جمع / 171 /عينة من 13 قطيع أغنام من ثلاث محافظات في سورية /حلب، الرقة، دير الزور/ وکانت العينات (أجنه مجهضة – مرارة – مشيمة – مسحات مهبلية) من أغنام العواس ، حيث تم نقل العينات بشروط صحية معقمة في حافظات تحوي على الجليد، ثم تم حفظها في درجة حرارة -20م (Hum et al., 2009) حتى إجراء الاختبارات اللازمة عليها.

 

البيئات الزرعية الجرثومية:

 

1-     وسط سکيرو أغار الخاص بالکامبيلوباکتر:

                                         Skirrow's Campylobacter selective medium                      

  • وسط الکامبيلوباکتر اغار Campylobacter Agar Base :

    Proteose Peptone                15Gms/litre                              

    Liver digest                             2.5 g/l                                       

    Yeast extract                              5 g/l                                          

    Sodium chloride                     5g/l                                           

   Agar                                      12  g/l                                       

                                                 PH=7.4±0.2                           

  • المواد المضافة للمنبت التمييزي للکامبيلوباکتر :

                          Campylobacter Supplement-III(Skirrow)    

   کل أمبولة کافية ل500مل من الوسط

بوليميکسين ب           Polymyxin B     1.250 IU

فانکومايسين             Vancomycin      5.00 Mg

تريمثوبريم             Trimethoprim    2.500Mg

  • دم أغنام غير مفبرن: Defibrinated sheep blood

1-     مرق الثيوغليکولات :  Thioglycollate broth

2-     أغار الحديد والسکر الثلاثيT.S.I  (Triple Sugar Iron)

 

المحاليل  المستخدمة لإجراء الاختبارات الکيمياحيوية:

  • کاشف حلمهة الهيبورات :Hippurate hydrolysis testing reagent
  •  محلول هيبورات الصوديوم 1%      Sodium Hippurate solution   (1غ هيبورات الصوديوم و 100مل ماء مقطر)

يصب في کل أنبوب0.4 مل من المحلول

  •  محلول الننهدرين : Ninhydrine solution
  • ننهدرين          Ninhydrine   3.5 g
  • أسيتون              50 ml      Acetone
  • بوتانول            Butanol     50 ml

    نمزج أولاً الأسيتون والبوتانول ثم نضيف لها الننهدرين

  • کاشف الاوکسيداز: Oxidase Discs
  • محلول بيروکسيد الهيدروجين 3% :3% Hydrogen peroxide solution (H2O2)
  • صبغة غرام  Gram stain:

 

طرق العمل:

  • تحضير العينات:

بالنسبة لعينات الأجنة من الأعضاء الداخلية (کبد، طحال، کلية، رئة) فقد أخذت في ظروف معقمة من الأجنة باستخدام مشارط ومقصات معقمة حيث قسمنا العضو إلى قسمين وطبعنا الجزء الداخلي من العضو على المنبت ، أما بالنسبة للمشيمة فقد تمت الزراعة من الفلقات التي تملک لون بني مصفر(Hum et al., 2009) ، أما بالنسبة لمحتويات معدة الجنين والمسحات المهبلية وعينات المرارة  فقد تم أخذ مسحات وزرعت مباشرة على المنبت باستخدام سلک الزرع.

  • الزرع على الوسط الانتقائي :Plating on selective medium

تم الاستنبات باستخدام سلک الزرعwire loop على المنبت الانتقائي بطريقة التخطيط وحضنت العينات في أجواء قليلة الهواء باستخدام جرة اللاهوائيات وباستخدام عبوات توليد الغاز التجارية أو باستخدام الشمعة على درجة حرارة 25 م ولمدة 5أيام (OIE, 2008).

  • التعرف على الکامبيلوباکتر : Identification of Campylobacter

 

أولاً: الصفات المزرعية: تم فحص جميع المستعمرات النامية على أطباق بتري حيث ظهرت هذه الجراثيم في العزل الأولي على شکل مستعمرات : نصف شفافة منخفضة ، مسطحة ، ومظهرها محبب وتنتشر على طول اتجاه التخطيط. وقد زرعت المستعمرات المشکوک بها مرة أخرى على نفس المنبت بغرض التنقية وظهرت على شکل مستعمرات ناعمة ، محدبة ، بيضاء رمادية (Bryner et al., 1962).

 

ثانياً: صبغة غرام: عند الصباغة بصبغة غرام لم تتقبل هذه الجراثيم الصبغة ، حيث ظهرت بلون وردي وهو لون الصبغة البديلة مما يدل على أنها جراثيم سلبية الغرام  وعند فحصها بالمجهر ظهرت على شکل الضمة أو شکل حرف S أو الشکل اللولبي أما في المزارع القديمة فإنها تميل للتکور (Smibert, 1974).

ثالثاً: اختبار الحرکة: أجري هذا الاختبار على المستعمرات النامية على المنابت الحديثة، حيث تنقل نقطة صغيرة من المستعمرة الجرثومية حديثة النمو إلى وسط شريحة وتعلق بنقطتين من المحلول الفيزيولوجي ثم يوضع عليها ساترة زجاجية وتفحص بالتکبير المتوسط مع تقليل الإضاءة ونلاحظ أن هذه الجراثيم تتحرک بحرکة سهمية سريعة اندفاعية (Crock screw) تميز هذه الجراثيم (Kudirkiene et al., 2008).

 

رابعاً: متطلبات الأوکسجين: هذه الجراثيم قليلة الألفة للأوکسجين فهي تحتاج في نموها إلى (5% O2 , 10% Co2 85% N2) (Roshdy, 2000).

 

خامساً :الاختبارات الکيميا حيوية: Biochemical Tests

1 - اختبار الکاتلاز: يجرى هذا الاختبار على المستعمرات الحديثة ، حيث توضع مستعمـرة جرثوميـة على شريحة زجاجية ويضاف إليها الماء الاوکسجيني 3% ويلاحـظ وجود الفقاعات الغازية مباشرة في حال کانت النتيجة ايجابيـة  (Kudirkiene et al., 2008).

2 - اختبار الاوکسيداز: نأخذ قرص من أقراص الکاشف الجاهزة وتؤخذ المستعمرة الجرثومية بواسطة سلک الزرع وتفرش على القرص فنلاحظ تغير اللون إلى بنفسجي أو ازرق غامق خلال 10 دقائق (Kudirkiene et al., 2008).

3 - حلمهة الهيبورات: نأخذ أنبوب يحتوي على 0.4 مل من کاشف هيبورات الصوديوم (1%) ونزرع المستعمرة الجرثومية وتحضن لمدة ساعتين في حمام مائي ثم نضيف کاشف الننهدرين 0.2 مل ويحضن لمدة 15 دقيقة ، ظهور اللون البنفسجي دليل على ايجابية الاختبار (Baron et al., 1994).

4 - النمو على وسط الغليسين: نحضر وسط الثيوغليکولات غليسين حيث نأخذ 1غ غليسيـن و100 مل مـرق ثيوغليکولات ونحضـن المستعمرة الجرثومية بدرجة حرارة 25 لمدة 5 أيام تحت شـروط لاهوائيـة ونفحص الحرکة تحت المجهر (PARK et al., 1984).

 

سادساً :التحسس الجرثومي:Antibiotic sensitivity

فرشت قطرة من معلق جرثومي على کامل سطح أطباق الکامبيلوباکتر اغار ووضع على سطح کل طبق أقراص مشبعة بالصادات الحيوية التالية:

  • البنسلين                          Penicillin          10 IU))
  • الجنتامايسين                  Gentamycin        (10 mcg)
  • النيومايسين                       Neomycin           (30 mcg)
  • ارثرومايسين                 Erythromycin           (15 mcg)
  • اوکسي تتراسکلين Tetracycline          Oxy           (30 mcg)
  • ستربتومايسين                 Streptomycin           (10 mcg)
  • سيبروفلوکساسين             Ciprofloxacin             (5 mcg)
  • حمض النالدکسک Nalidixic acid                          (30 mcg)
  • السيفالوثين Cephalothin                                 (30 mcg)

وبعد الحضن في درجة 25م لمدة 48 ساعة تم قياس قطر منطقة الصد حول الأقراص باستخدام مسطرة مدرجة وأجري تقييم الحساسية والمقاومة لهذه الصادات.

 

Results

النتائــج

 

تم دراسة 13 قطيع في ثلاث محافظات هي حلب والرقة ودير الزور وکان عدد الأغنام في هذه القطعان 930 وعدد الأغنام الحوامل 720 حيث تم جمع العينات وعددها (171) عينة من جميع الأغنام المجهضة.

أما بالنسبة للأعراض المشاهدة فإن أهم عرض هو الإجهاض في الأسابيع الأخيرة من الحمل ولوحظ حدوث احتباس مشيمة في بعض الأغنام المجهضة تبعه وهن وضعف وذلک بسبب التهاب المجاري التناسلية الناتج عن العدوى الثانوية.

وبما أن عدد الأغنام الحوامل هو 720 وعدد الأغنام المجهضة هو 171 بالتالي فإن معدل الإجهاض هو 23.75%، وقد تم عزل الکامبيلوباکتر الجنينية من 15 نعجة من أصل 171 نعجة مجهضة وبالتالي فإن نسبة الحالات الايجابية للکامبيلوباکتر الجنينية في هذه الدراسة 8.77%، وکانت نسبة الحالات الإيجابية في محافظة حلب 11حالة من أصل 105 نعجة مجهضة أي بنسبة 10.5%، وکانت نسبة الحالات الإيجابية في محافظة الرقة حالتين من أصل 29 نعجة مجهضة أي بنسبة 6.9%، وکانت نسبة الحالات الإيجابية في محافظة دير الزور حالتين من أصل 37 نعجة مجهضة أي بنسبة 5.4% .

                                

ويوضح الجدول رقم 1: التوزيع التکراري النسبي للأغنام الإيجابية والسلبية في مناطق الدراسة خلال الفترة من تشرين الثاني   2009وحتى نيسان 2010

 

المحافظة

معدل الإجهاض بالکامبيلوباکتر الجنينية %

التکرار التوزيعي المئوي للأغنام السلبية %

حلب

10.5

 

89.5

 

الرقة

6.9

 

93.1

 

دير الزور

5.4

94.6

المجموع

8.77

 

91.23

 

 

التحليل الإحصائي

تمت دراسـة الفروقات المعنوية بين معدلات الإجهاضات وبين الحالات الإيجابيـة وعوامـل الخطورة المرافقة باستخدام اختبار بيرسون مربع کاي (pearson's chi square). وقد تم التحليل الإحصائي باستخدام نظم التحليل الأمريکي (Statistix, 2000). حيث أنه لم تکن هناک فروقات معنوية بين معدلات الإجهاض في کل من مناطق حلب والرقة (p=0.2918). وکذا بين حلب ودير الزور (p=1.00). وکذلک لم تکن هناک فروقات معنوية بين الرقة ودير الزور (p=0.2950). أما بالنسبة لمعدل الإجهاض الذي يسببه بالکامبيلوباکتر الجنيني في مناطق الدراسة فإنه لم تکن هناک فروقات معنوية بين معدل الإجهاض الذي يسببه الکامبيلوباکتر الجنيني في کل من حلب والرقة ودير الزور.

 

DISCUSSION

المناقشـة

 

يعتبر هذا البحث هو الأول في سورية حول عزل الکامبيلوباکتر الجنينية عند الأغنام المجهضة في سورية. وکما ذکرنا سابقاً من خلال دراسة13 قطيع في ثلاث محافظات سورية وهي حلب الرقة ، دير الزور، حيث کان عدد الأغنام في هذه القطعان  930رأس من أغنام العواس وکان عدد الأغنام الحوامل 720 وقد تم جمع العينات وعددها 171 عينة من جميع الأغنام المجهضة في هذه الدراسة. ووجدنا في بحثنا أن معدل الإجهاض هو 23.75% وهي نسبة عالية حيث أننا نخسر حوالي ربع الأجنة المتوقع ولادتها سنوياً بسبب الکامبيلوباکتر الجنيني وغيره من مسببات الإجهاض، أما حصة الکامبيلوباکتر الجنيني من هذه الإجهاضات في هذه الدراسة فهي 8.77%، وقد ظهر الکامبيلوباکتر في 6 قطعان من أصل 13 قطيع أي بنسبة 46.15% . وقد کانت نسبة الحالات الايجابية للکامبيلوباکتر الجنيني في محافظة حلب (10.5%) وفي محافظة الرقة (6.9%) وفي محافظة دير الزور (5.4%)

وقد کانت نتائـج الدراسـة متوافقـة مع الدراسـة التي أجراهـا (Yesilmen and Gül, 2007) حيث وجد الباحثان أنه من 100عينة جنين مجهض کان هناک 10 عينات ايجابية للکامبيلوباکتر أي بنسبة (10%) وقد کان منها 7 ايجابية للکامبيلوباکتر الجنينية أي نسبة 7% . کما توافقت الدراسة مع الدراسة التي أجراها (Diker, 1985) حيث وجد انه من أصل 124 عينة جنين مجهض کان هناک 15 عينة ايجابية للکامبيلوباکتر الجنينية أي بنسبة 12%. وأيضاً توافقت نتائج الدراسة مع الدراسة التي أجراها (Kenar et al., 1990) حيث وجد انه من أصل 303 عينات لأجنة مجهضة کان هناک 20 عينة ايجابية للکامبيلوباکتر الجنينية أي بنسبة 6.6%. کما توافقت نتائج الدراسة مع الدراسة التي أجراها (Hansen et al., 1990) حيث وجد أن مخاطر الإجهاض الناتج عن الکامبيلوباکتر في الولايات المتحدة يتراوح بين 5-17%. ولم تتوافق نتائج الدراسة مع الدراسة التي أجراها (Muz et al., 1999) حيث وجد أنه من أصل 110 عينـات لأجنـة مجهضـة وجد أن هناک 5 عينات ايجابية للکامبيلوباکتر الجنينيـة أي بنسبـة 4.5%. ولـم تتوافـق مـع الدراسـة التي أجراهـا (Kenar and Erganis, 1990) حيث فحص 35 جنين مجهض في موسم التناسل 1991- 1992ووجد 5 عينات ايجابية للکامبيلوباکتر الجنينية أي بنسبة 14.2%. ولم تتوافق مع الدراسة التي أجراها (Erdogan et al., 1993) حيث عزل 4 عينات ايجابية للکامبيلوباکتر الجنينية من أصل 145 عينة جنين مجهض أي بنسبة 2.7% بين عامي 1989-1992 . کما أن نتائج الدراسة لم تتوافق مع الدراسة التي أجراها (Latinovic et al., 1985) حيث وجد أن نسبة الإجهاض الناتجة عن الکامبيلوباکتر الجنينية کانت 15.2%.

 

CONCLUSIONS

الاستنتاجـات

 

  • تم عزل الکامبيلوباکتر الجنينية من الأغنام المجهضة في المنطقة الشمالية من سورية.
  • کانت نسبة الحالات الايجابية للکامبيلوباکتر الجنينية في الأغنام المجهضة في هذه الدراسة 8.77% .
  • بلغت نسبة الإجهاض في أغنام المنطقة الشمالية في هذه الدراسة 23.75 %.

 

References

 

Andrews, J. and Frank, F.W. (1974): Comparison of four diagnostic tests for detection of bovine genital vibriosis. J. Am. Vet. Med. Assoc 165: 695-697.

Baron, E.J.; Peterson, L.R. and Finegold, B.M. (1994): Baily and Scott's Diagnostic Microbiology. 9th Ed. Mosby, St. Louis Baltimore.

Bryner, J.H.; O'Berry, P.A. and Frank, A.H. (1962): Dissociation studies of vibrios from the bovine genital tract. Am. J. Vet. Res. 23:     32-41.

Bryner, J.H.; O'Berry, P.A. and Frank, A.H. (1964): Vibrio infection of the digestive organs of cattle. Am. J. Vet. Res. 25: 1048-1050.

Buchanan, R.F. and Gibbons, N.F. (1974): Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology. 8th Edition. The Williams & Wilkins Co., Baltimore.

Butzler, J. (1984): Campylobacter Infection in Man and Animals. CRC Press, Inc. Boca Raton, FL.

Cottral, G.E. (1978): Manual of standardized methods for veterinary microbiology, p. 461-471. CornellUniversity Press, Ithaca, N.Y.

Dasti, J.I. (2007): Identification and characterization of Campylobacter jejuni factors relevant for the infection process ph.D. Thesis, George August University, Germany.

Dennis, S.M. (1967): The possible role of the raven in the transmission of ovine vibriosis. Aust. Vet. J. 43: 45-48.

Diker, K.S. (1985): Studies on the identification of Campylobacter species isolated from sheep and cattle. DogaBilim. Derg. 9: 232-240.

Dyre, N.W. (2008): Diagnosis of Ovine Abortion – Getting the Most Out of Your Diagnostic Laboratory. Sheep Research Report: 13-14.

Erdogan, I.; Gurel, A.; Tekin, C.; Uyanýk, F. and Bitgel, A. (1993): The determination anddistribution of bacterial abortus in goats, cow and sheep in Thrace region. J. Pendik Vet. Microbiol., 24: 23-35.

Florent, A. (1959): Les deux vibriosis genitales: la vibriose duea V. fetus venerealis et la vibriose d'origine intestinaleduea V.fetus intestinalis. Meded. Veeartsenijsch. Rijksuniv. Gent 3: 1-60.

Fox, J.G. (1982): Campylobacteriosis: a “new” disease in laboratory animals. Lab. Anim. Sci, 32: 625–637.

Franco, D.A. (1988):Campylobacter species: considerations for controlling a foodborne pathogen. J. Food. Prot. 51:145–153.

Garcia, M.M.; Eaglesome, M.D. and Rigby, C. (1983): Campylobacters important in veterinary medicine. Vet. Bull. 53: 793-818.

Goodwin, C.S.; McCulloch, R.K.; Armstrong, J.A. and Wee, S.H. (1985): Unusual cellular fatty acids and distinctive ultrastructure in a new spiral bacterium (Campylobacter-pyloridis) from the human gastric mucosa. J. Med. Microbiol. 19: 257-267.

Grogono-Thomas, R.; Dworkin, J.; Blaser, M.J. and Newell, D.G. (2000): Roles of the surface layer proteins of Campylobacter fetus subsp. fetus in ovine abortion. Infect. Immun. 68: 1687-1691.

Hansen, D.E.; Hedstrom, O.R.; Sonn, R.J. and Synder, P.S. (1990): Efficacy of a vaccineto prevent Chlamydia or Campylobacter induced abortions in ewes. JAVMA, 196: 731-734.

Harvey, S.M. and Greenwood, J.R. (1983): Probable Campylobacterfetus subsp. fetus gastroenteritis. J. Clin. Microbiol. 18: 1278-1279.

Hazeleger, W.; Arkesteijn, Tooropbouma, A. and Beumer, R. (1994): Detection of the coccoid from or campylobacter jejuni in chicken products with the use of the polymerase chain reaction. Int. J. Syst. Bacteriol. 49: 1171-1175.

Hum, S.; Hornitzky, M. and Berg, T. (2009): Ovine campylobacteriosis. Elizabeth Macarthur Agricultural Institute. Australia:1-8.

Jones, D.M.; Curry, A. and Fox, A.J. (1985): An ultrastructural study of the gastric Campylobacter-like organism "Campylobacter pyloridis."  J. Med. Microbiol. 131: 2235-2341.

Justin, S. and Luther, Ph.D. (2006): Abortions in Sheep Causes, Control and Prevention. NDSU. AS-1317.

Karmali, M.A. and Fleming, P.C. (1979): Campylobacter enteritis in children. J. Pediatr. 94: 527-533.

Kenar, B. and Erganis, O. (1990): Isolation and antibiotic susceptibility of Campylobacter spp. in aborted ovine fetuses in the central Black Sea. Veterinarium .5: 4-11.

Kenar, B.; Erganis, O.; Kaya, O. and Guler, L. (1990): Bacteriological and serological survey on brucella, campylobacter, salmonella and chlamydia infections caused to sheep abortion in Konya region (central Anatolia) in Turkey. Veterinarium, 1: 17-20 .

Kudirkiene, A.; Malakauskas, A.; Serniene, L. and Malakauskas, M. (2008): Isolation and identifaction of thermophilic Campylobacter ssp. by PCR-RFLP in broiler flocks. Veterinarija IR Zootechnik, A. 42(64): 44-46.

Latinoviç, V.; Popovic, M. and Nevjestic, A. (1985): Privi slucajevi izolacije bakterija roda Campylobacter kodgoveda i ovaca u Srbich. Veterinaria, Sarajevo, 34: 367-375.

McCoy, E.C.; Doyle, D.; Wiltberger, H.; Burda, K. and Winter, A.J. (1975): Flagellar ultrastructure and flagella-associated antigens of campylobacter fetus. J. Bacteriol 122: 307-315.

Mcfadyean, J. and Stockman, S. (1913): Report of the Departmental committee appointed by the board of the Agriculture and Fisheries to inquire into Epizootic Abortion. part3. Abortion in sheep. London: HMSO.

Mearns, R. (2007): Campylobateriosis. pages131-132 In:Diseases of sheep ed, I.D. Aitken. Blackwell publishing, Oxford, U.K.

Meinershagen, W.A.; Waldhalm, D.G.; Frank, F.W. and Serivner, L.H. (1965): Magpies as a reservoir of infection for ovine vibriosis. J. Am. Vet. Med. Assoc.147: 843-845.

Moran, A.P. and Upton, M.E. (1987): Factors affecting production of coccoid forms by Campylobacter jejuni on solid media during incubation. J. App. Bacteriol 62: 527–537.

Muz, A.; Ertas, H.B.; Ongor, H.; Gulcu, H.B.; Ozer, H.; Eroksuz, H.; Dabak, M.; Basbug, O. and Kalender, H. (1999): Bacteriologic, serologic and pathologic studies onaborted cases of goats and sheep in Elazýð and it.s vicinity. Tr. J. Vet. Anim. Sci., 23:     177-188.

OIE "Organismo Internacional de Epizootias" (2008): Bovine genital campylobacteriosis chapter 2. 4. 5.

On, S.L.W.; Bloch, B.; Holmes, B.; Hoste, B. and Vandamme, P. (1995): Campylobacter hyointestinalis subsp. lawsonii subsp. nov., isolated from the porcine stomach, and an emended description of Campylobacter hyointestinalis. International J. Systemat. Bacteriol 45: 767–774.

PARK, C.E.; Smibert, R.M.; Blaser, M.J.; Vanderzant, C. and Stern, N. (1984): Campylobacter In: "Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods "2nd Ed. Speck. M(ed) American public Health Association, Washington, D.C.

Plastridge, W.N.; Koths, M.E. and Williams, L.F. (1961): Antibiotic mediums for the isolation of vibrios from bull semen. Amer. J. Vet. Res. 22: 867-869.

Plastridge, W.N.; Stula, E.F. and Williams, L.F. (1964): Vibrio fetus infection and reinfection in heifers.as determined by cultural tests using blood agar plus antibiotics. Am. J. Vet. Res. 25: 710-713.

Prévot, A.R. (1940): Etudes de systématiquebactérienne. V. Essai de classification des vibrions anaérobies. Ann. Inst. Pasteur (Paris) 64: 117-125.

Roshdy, M.S.A. (2000): Prevalence of Campylobacter jejuni in raw milk and infantile diarrhoea in Assiut. Master Degree Thesisi, Fac. of Med.AssiutUniversity.

Senok, A.C. and Boota, G.A. (2009): CAMPYLOBACTER ENTERITIS IN THE Arabian Gulf. J. infect Developing Countries. 3(2):74-82.

Skirrow, M.B. (1977): Campylobacter enteritis: a “new” disease. Br. Med. J. 2: 9–11. Smith, T.; Orcutt, M.L. (1927). Vibrios from calves and their serological relation to Vibirio fetus. J. Exp. Med. 45: 391-397.

Smibert, R.M. (1984): Genus Campylobacter, p. 111-118. In N.R. Krieg, and H.G. Holt (ed.), Bergey's manual of systematic bacteriology, vol. 1. The Williams & Wilkins Co., Baltimore.

Smibert, R.M. (1974): Genus II. Campylobacter Sebald and Veron 1963, 907, p. 207-212. In R.E. Buchanan and N. E.Gibbons (ed.), Bergey's manual of determinative bacteriology, 8th ed. The Williams & Wilkins Co., Baltimore.

Smibert, R.M. (1965): Vibrio fetus var. intestinalis isolated from the faecal and intestinal contents of clinically normal sheep: Biochemical and cultural characteristics of micro aerophilic vibrios isolated from the intestinal contents of sheep. Am. J. Vet. Res., 26:       320-327.

Smibert, R.M.; Von Graevenenitz, A. (1980): A human strain of C. fetus spp. intestinalis grown at 42°C. J. Clin. Pathol. 33: 603-64.

Smith, T. (1918): Spirilla associated with disease of  the fetal membranes in cattle (infectious abortion). J. Exp. Med. 28: 701-719.

Statistix (2000): Manual Guide. Version 4.0, Microsoft Co. Ltd. USA.

Timoney, J.F.; Gillespie, J.H.; Scott, F.W. and Barlough, J.E. (1988): Hagan and Bruner`s microbiology and infectious diseases of domestic animals, 8th ed., pp. 153-160. CornellUniversity Press, Ithaca, NY.

Ursing, J.B.; Lior, H. and Owen, R.J. (1994): Proposal of minimal standards for describing new species of the family Campylobacteraceae.  Int  J. Syst Bacteriol 44: 842–845.

Vandamme, P.; Falsen, E.; Rossau, R.; Hoste, B.; Segers, P.; Tytgat, R. and De Ley, J. (1991): Revision of Campylobacter, Helicobacter, and Wolinella taxonomy: emendation of generic descriptions and proposal of Arcobacter gen. nov. Int. J. Syst. Bacteriol. 41:       88-103.

Yesilmen, S. and Gül, K. (2007): Isolation, identification and antibiotic susceptibility of Campylobacter spp. in aborted sheep fetuses Medycyna Wet, 63: (10).

 

 

 

References
 
Andrews, J. and Frank, F.W. (1974): Comparison of four diagnostic tests for detection of bovine genital vibriosis. J. Am. Vet. Med. Assoc 165: 695-697.
Baron, E.J.; Peterson, L.R. and Finegold, B.M. (1994): Baily and Scott's Diagnostic Microbiology. 9th Ed. Mosby, St. Louis Baltimore.
Bryner, J.H.; O'Berry, P.A. and Frank, A.H. (1962): Dissociation studies of vibrios from the bovine genital tract. Am. J. Vet. Res. 23:     32-41.
Bryner, J.H.; O'Berry, P.A. and Frank, A.H. (1964): Vibrio infection of the digestive organs of cattle. Am. J. Vet. Res. 25: 1048-1050.
Buchanan, R.F. and Gibbons, N.F. (1974): Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology. 8th Edition. The Williams & Wilkins Co., Baltimore.
Butzler, J. (1984): Campylobacter Infection in Man and Animals. CRC Press, Inc. Boca Raton, FL.
Cottral, G.E. (1978): Manual of standardized methods for veterinary microbiology, p. 461-471. CornellUniversity Press, Ithaca, N.Y.
Dasti, J.I. (2007): Identification and characterization of Campylobacter jejuni factors relevant for the infection process ph.D. Thesis, George August University, Germany.
Dennis, S.M. (1967): The possible role of the raven in the transmission of ovine vibriosis. Aust. Vet. J. 43: 45-48.
Diker, K.S. (1985): Studies on the identification of Campylobacter species isolated from sheep and cattle. DogaBilim. Derg. 9: 232-240.
Dyre, N.W. (2008): Diagnosis of Ovine Abortion – Getting the Most Out of Your Diagnostic Laboratory. Sheep Research Report: 13-14.
Erdogan, I.; Gurel, A.; Tekin, C.; Uyanýk, F. and Bitgel, A. (1993): The determination anddistribution of bacterial abortus in goats, cow and sheep in Thrace region. J. Pendik Vet. Microbiol., 24: 23-35.
Florent, A. (1959): Les deux vibriosis genitales: la vibriose duea V. fetus venerealis et la vibriose d'origine intestinaleduea V.fetus intestinalis. Meded. Veeartsenijsch. Rijksuniv. Gent 3: 1-60.
Fox, J.G. (1982): Campylobacteriosis: a “new” disease in laboratory animals. Lab. Anim. Sci, 32: 625–637.
Franco, D.A. (1988):Campylobacter species: considerations for controlling a foodborne pathogen. J. Food. Prot. 51:145–153.
Garcia, M.M.; Eaglesome, M.D. and Rigby, C. (1983): Campylobacters important in veterinary medicine. Vet. Bull. 53: 793-818.
Goodwin, C.S.; McCulloch, R.K.; Armstrong, J.A. and Wee, S.H. (1985): Unusual cellular fatty acids and distinctive ultrastructure in a new spiral bacterium (Campylobacter-pyloridis) from the human gastric mucosa. J. Med. Microbiol. 19: 257-267.
Grogono-Thomas, R.; Dworkin, J.; Blaser, M.J. and Newell, D.G. (2000): Roles of the surface layer proteins of Campylobacter fetus subsp. fetus in ovine abortion. Infect. Immun. 68: 1687-1691.
Hansen, D.E.; Hedstrom, O.R.; Sonn, R.J. and Synder, P.S. (1990): Efficacy of a vaccineto prevent Chlamydia or Campylobacter induced abortions in ewes. JAVMA, 196: 731-734.
Harvey, S.M. and Greenwood, J.R. (1983): Probable Campylobacterfetus subsp. fetus gastroenteritis. J. Clin. Microbiol. 18: 1278-1279.
Hazeleger, W.; Arkesteijn, Tooropbouma, A. and Beumer, R. (1994): Detection of the coccoid from or campylobacter jejuni in chicken products with the use of the polymerase chain reaction. Int. J. Syst. Bacteriol. 49: 1171-1175.
Hum, S.; Hornitzky, M. and Berg, T. (2009): Ovine campylobacteriosis. Elizabeth Macarthur Agricultural Institute. Australia:1-8.
Jones, D.M.; Curry, A. and Fox, A.J. (1985): An ultrastructural study of the gastric Campylobacter-like organism "Campylobacter pyloridis."  J. Med. Microbiol. 131: 2235-2341.
Justin, S. and Luther, Ph.D. (2006): Abortions in Sheep Causes, Control and Prevention. NDSU. AS-1317.
Karmali, M.A. and Fleming, P.C. (1979): Campylobacter enteritis in children. J. Pediatr. 94: 527-533.
Kenar, B. and Erganis, O. (1990): Isolation and antibiotic susceptibility of Campylobacter spp. in aborted ovine fetuses in the central Black Sea. Veterinarium .5: 4-11.
Kenar, B.; Erganis, O.; Kaya, O. and Guler, L. (1990): Bacteriological and serological survey on brucella, campylobacter, salmonella and chlamydia infections caused to sheep abortion in Konya region (central Anatolia) in Turkey. Veterinarium, 1: 17-20 .
Kudirkiene, A.; Malakauskas, A.; Serniene, L. and Malakauskas, M. (2008): Isolation and identifaction of thermophilic Campylobacter ssp. by PCR-RFLP in broiler flocks. Veterinarija IR Zootechnik, A. 42(64): 44-46.
Latinoviç, V.; Popovic, M. and Nevjestic, A. (1985): Privi slucajevi izolacije bakterija roda Campylobacter kodgoveda i ovaca u Srbich. Veterinaria, Sarajevo, 34: 367-375.
McCoy, E.C.; Doyle, D.; Wiltberger, H.; Burda, K. and Winter, A.J. (1975): Flagellar ultrastructure and flagella-associated antigens of campylobacter fetus. J. Bacteriol 122: 307-315.
Mcfadyean, J. and Stockman, S. (1913): Report of the Departmental committee appointed by the board of the Agriculture and Fisheries to inquire into Epizootic Abortion. part3. Abortion in sheep. London: HMSO.
Mearns, R. (2007): Campylobateriosis. pages131-132 In:Diseases of sheep ed, I.D. Aitken. Blackwell publishing, Oxford, U.K.
Meinershagen, W.A.; Waldhalm, D.G.; Frank, F.W. and Serivner, L.H. (1965): Magpies as a reservoir of infection for ovine vibriosis. J. Am. Vet. Med. Assoc.147: 843-845.
Moran, A.P. and Upton, M.E. (1987): Factors affecting production of coccoid forms by Campylobacter jejuni on solid media during incubation. J. App. Bacteriol 62: 527–537.
Muz, A.; Ertas, H.B.; Ongor, H.; Gulcu, H.B.; Ozer, H.; Eroksuz, H.; Dabak, M.; Basbug, O. and Kalender, H. (1999): Bacteriologic, serologic and pathologic studies onaborted cases of goats and sheep in Elazýð and it.s vicinity. Tr. J. Vet. Anim. Sci., 23:     177-188.
OIE "Organismo Internacional de Epizootias" (2008): Bovine genital campylobacteriosis chapter 2. 4. 5.
On, S.L.W.; Bloch, B.; Holmes, B.; Hoste, B. and Vandamme, P. (1995): Campylobacter hyointestinalis subsp. lawsonii subsp. nov., isolated from the porcine stomach, and an emended description of Campylobacter hyointestinalis. International J. Systemat. Bacteriol 45: 767–774.
PARK, C.E.; Smibert, R.M.; Blaser, M.J.; Vanderzant, C. and Stern, N. (1984): Campylobacter In: "Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods "2nd Ed. Speck. M(ed) American public Health Association, Washington, D.C.
Plastridge, W.N.; Koths, M.E. and Williams, L.F. (1961): Antibiotic mediums for the isolation of vibrios from bull semen. Amer. J. Vet. Res. 22: 867-869.
Plastridge, W.N.; Stula, E.F. and Williams, L.F. (1964): Vibrio fetus infection and reinfection in heifers.as determined by cultural tests using blood agar plus antibiotics. Am. J. Vet. Res. 25: 710-713.
Prévot, A.R. (1940): Etudes de systématiquebactérienne. V. Essai de classification des vibrions anaérobies. Ann. Inst. Pasteur (Paris) 64: 117-125.
Roshdy, M.S.A. (2000): Prevalence of Campylobacter jejuni in raw milk and infantile diarrhoea in Assiut. Master Degree Thesisi, Fac. of Med.AssiutUniversity.
Senok, A.C. and Boota, G.A. (2009): CAMPYLOBACTER ENTERITIS IN THE Arabian Gulf. J. infect Developing Countries. 3(2):74-82.
Skirrow, M.B. (1977): Campylobacter enteritis: a “new” disease. Br. Med. J. 2: 9–11. Smith, T.; Orcutt, M.L. (1927). Vibrios from calves and their serological relation to Vibirio fetus. J. Exp. Med. 45: 391-397.
Smibert, R.M. (1984): Genus Campylobacter, p. 111-118. In N.R. Krieg, and H.G. Holt (ed.), Bergey's manual of systematic bacteriology, vol. 1. The Williams & Wilkins Co., Baltimore.
Smibert, R.M. (1974): Genus II. Campylobacter Sebald and Veron 1963, 907, p. 207-212. In R.E. Buchanan and N. E.Gibbons (ed.), Bergey's manual of determinative bacteriology, 8th ed. The Williams & Wilkins Co., Baltimore.
Smibert, R.M. (1965): Vibrio fetus var. intestinalis isolated from the faecal and intestinal contents of clinically normal sheep: Biochemical and cultural characteristics of micro aerophilic vibrios isolated from the intestinal contents of sheep. Am. J. Vet. Res., 26:       320-327.
Smibert, R.M.; Von Graevenenitz, A. (1980): A human strain of C. fetus spp. intestinalis grown at 42°C. J. Clin. Pathol. 33: 603-64.
Smith, T. (1918): Spirilla associated with disease of  the fetal membranes in cattle (infectious abortion). J. Exp. Med. 28: 701-719.
Statistix (2000): Manual Guide. Version 4.0, Microsoft Co. Ltd. USA.
Timoney, J.F.; Gillespie, J.H.; Scott, F.W. and Barlough, J.E. (1988): Hagan and Bruner`s microbiology and infectious diseases of domestic animals, 8th ed., pp. 153-160. CornellUniversity Press, Ithaca, NY.
Ursing, J.B.; Lior, H. and Owen, R.J. (1994): Proposal of minimal standards for describing new species of the family Campylobacteraceae.  Int  J. Syst Bacteriol 44: 842–845.
Vandamme, P.; Falsen, E.; Rossau, R.; Hoste, B.; Segers, P.; Tytgat, R. and De Ley, J. (1991): Revision of Campylobacter, Helicobacter, and Wolinella taxonomy: emendation of generic descriptions and proposal of Arcobacter gen. nov. Int. J. Syst. Bacteriol. 41:       88-103.
Yesilmen, S. and Gül, K. (2007): Isolation, identification and antibiotic susceptibility of Campylobacter spp. in aborted sheep fetuses Medycyna Wet, 63: (10).